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            shRNA表達克隆的這些特性,了解一下

            發布日期: 2021-10-27
            瀏覽人氣: 138
               shRNA表達克隆是將針對靶基因設計shRNA(小發夾結構RNAi)靶點序列,然后將其裝于表達載體中,我公司現可提供4套表達載體,可用于對人、小鼠、大鼠以及其他物種的全基因組范圍的基因表達抑制研究。公司還提供相應的全長人類和小鼠基因的ORF表達克隆,可用于相應基因的功能獲得研究,還可用于shRNA克隆的確證。
              
              shRNA表達克隆的特性
              1.所有shRNA靶點序列的選取均經過準確算法計算。根據基因的不同,shRNA其莖的長度在19到29堿基對之間。這些保證shRNA克隆表達后有很高的表達抑制效率和zui低的脫靶效應(offtargeteffect)。
              
              2.克隆shRNA所采用的載體有慢病毒載體和以哺乳動物細胞為宿主的載體,各類載體擁有不同的啟動子和跟蹤標記基因可供選擇。
              
              3.載體中所帶有的綠色熒光跟蹤標記基因(eGFP)可以用于監測質粒載體的轉染效率和轉導病毒的感染效率。
              
              4.載體結構上帶有穩定細胞株的篩選標記(嘌呤霉素)和綠色熒光跟蹤標記基因(EGFP),這些特性使得該載體既能用于穩定抑制效應的研究,也
              5.可用于瞬時抑制效應的研究。
              
              6.使用慢病毒載體系統,可轉導shRNA進入常規的分裂細胞,以及不分裂而難以轉染的目的細胞株。
              
              7.載體的各部分序列已經過測序,包括啟動子、編碼shRNA的正義和反義鏈、發夾結構、終止子和其他接頭序列。
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